• 多因子检测-Luminex

    多因子检测样本的收集和处理

          正确的样本收集整理方法,是实验成功至关重要的步骤。目前可以检测样本类型有: 细胞上清、血清、血浆。尽管其他生物学样本没有经过验证,但是理论上也可以检测,这些样本包括: BAL,唾液,CSF,组织匀浆液和尿液。
    下面我们针对几种常见样本的收集、保存方法:


    1、血清
    全血室温(20-25 °C)凝固20-30min;
    室温1,000 x g 10min;
    收集上清,或者选择使用血清分离器;
    可选:如果样本是高血脂样本,请先在2-8℃10,000 x g 离心 10min,分离出下层血清;
    多因子检测血清样本要求新鲜;如果不能在24h内检测,需要分装在-80 ℃保存,避免反复冻融。


    2、血浆
    根据要求选择柠檬酸或EDTA作为抗凝剂。如果选择肝素作为抗凝剂,建议每毫升血不超过10IU肝素(肝素用量过高,可能会导致部分检测指标值偏高)。
    收集抗凝全血后30min内,在4℃下10,000 x g离心10min,分离收集血浆;
    可选:如果样本是高血脂样本,请先在2-8℃10,000 x g 离心 10min,分离出下层血浆;
    多因子检测血浆样本要求新鲜;如果不能在24h内检测,需要分装在-80 ℃保存,避免反复冻融。


    3、细胞培养上清
    检测分泌性的成份时,最好用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。

    4、组织样本
    如果可以,请按照参考文献推荐的方法。标本取完后液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的含有蛋白酶抑制剂的缓冲液, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
    保存过程中如果有沉淀,检测前样本应该再次离心去除沉淀,建议16,000 x g 离心5min。

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