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    表面染色流程-TONBO

    试剂准备:

    • 流式染色缓冲液 (Flow Cytometry Staining Buffer) :产品编号TNB-4222-L500
    • 12x75 mm 圆底流式管或 96孔圆底微孔板

     

    染色流程:

    1. 制备单细胞悬浮液,用流式染色缓冲液调整浓度至2 x 10 7- 2  x 10 8 cells/mL。

    2. 每管(或孔)加50 µL 细胞悬浮液。

    3. 加推荐量的抗体到样品里,细胞悬浮液+抗体的最终体积不应超过100µL。

    4. 4°C避光孵育20-­60分钟。

    5. 用200­-300 µL (微孔板) 或 1­2 mL (管) 染色缓冲液洗细胞.

    6. 300-­400 x g室温离心5分钟,弃掉上清液。短暂涡旋重悬细胞。

    7. 如果不需要加二抗,直接调到第10步 。

    8. 如果二抗是纯化抗体或生物素偶联抗体,加100 µL 稀释好的抗体到管里。

    9. 4°C避光孵育20-60分钟。

    10. 300­-400 x g室温离心5f分钟,弃掉上清液。短暂涡旋重悬细胞。

    11. 每管加入适当的染色缓冲液重悬细胞,上机检测或进行胞内染色。

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